atcc菌種的培養要求嚴格，需遵循標準化操作流程，確保菌種的活性、純度和遺傳穩定性。

　　一、atcc菌種培養基要求：

　　1.使用指定配方：

　　必須按照ATCC或說明書提供的特定培養基配方，不可隨意替換成分。

　　2.培養基制備與滅菌：

　　自制培養基需高壓滅菌，冷卻至50℃以下再倒板或分裝。

　　市售培養基需選擇可靠品牌，并檢查保質期和批號一致性。

　　3.添加特殊成分：

　　部分菌種需額外添加生長因子、抗生素（如萬古霉素）或血液（如羊血、馬血）。

　　二、atcc菌種操作規范要求：

　　1.無菌操作：

　　接種前用75%酒精擦拭臺面和器械，接種環需灼燒滅菌（酒精燈火焰中加熱至通紅）。

　　凍干菌種復蘇時，需快速解凍，避免污染。

　　2.傳代限制：

　　避免頻繁傳代，否則可能導致基因變異或活力下降。

　　長期保存需用甘油管（-80℃）或液氮冷凍保存。

　　3.污染防控：

　　定期清潔培養箱，清除污染皿，并用紫外燈消毒。

　　若發現雜菌污染（如霉菌斑點），立即棄用并復查操作流程。

　　三、atcc菌種保存與管理要求

　　1.短期保存：

　　斜面低溫保存：菌種接種于斜面培養基，37℃培養后密封，4℃保存（通常1-4周）。

　　甘油冷凍保存：菌液與30%甘油混合（1:1），存入-80℃冰箱或液氮罐。

　　2.長期保存：

　　液氮罐為最佳方法，需定期補充液氮。

　　凍干法（需專業設備）：真空凍干后密封，室溫或4℃保存。

　　3.存活性驗證：

　　定期復蘇菌種（如每半年一次），檢查生長狀態（菌落形態、革蘭染色結果）。

　　若活力下降，需從原始凍存管重新接種。